检测意义:以茉莉酸(jasmonic acid, JA)和茉莉酸甲酯(methyl jasmonate, MeJA)为代表的茉莉酸类植物激素(jasmonates, JAs)是一种新型天然植物生长调节剂,具有广谱的生理效应,普遍存在于多种高等植物体内。JAs既可以作为天然内源植物激素又可作为外源激素使用,参与到植物体的生长发育、“免疫”防御、基因表达等多方面,具有复杂的生理效应。但是由于内源JAs含量很低(µg ~ ng / g鲜重),杂质干扰很多,因此JAs对植物生长的确切机制和作用,以及外源性JAs引起的内源性JAs的变化等等研究受到分析方法的限制无法深入开展。
检测原理:制备茉莉酸甲酯单抗,进一步研发其ELISA检测试剂盒。
优势:
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成功制备出抗JA的单克隆抗体,同时发现该抗体对MeJA检测灵敏度更高,茉莉酸甲酯(MeJA)的IC50和LOD分别为2.02 ng/mL和0.20 ng/mL并建立出直接测定样品中JA含量和JAs总含量的ELISA方法,无须借助仪器分析。
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本实验选取6种不同的类似物作为交叉反应物来证明该方法的特异性。包括3种结构类似物(茉莉酸;二氢茉莉酸甲酯;葫芦酸)2种功能类似物(脱落酸;水杨酸)和1种生物合成前体(亚麻酸)。实验结果显示我司自主研发的抗体它对二氢茉莉酸甲酯虽然具有很高的特异性,但是该物质多为人工合成,植物体内发现的很少,因此可不考虑二氢茉莉酸对结果的影响。此外,该抗体对其他物质几乎没有响应。
交叉反应物的IC50以及交叉反应率CR
物质 |
IC50 (ng·mL-1) |
CR (×100%) |
茉莉酸甲酯 |
2.03 |
100 |
茉莉酸 |
3.56 |
57.0 |
二氢茉莉酸甲酯 |
0.670 |
303.0 |
葫芦酸 |
156 |
1.30 |
水杨酸 |
>10 000 |
<0.10 |
脱落酸 |
>10 000 |
<0.10 |
亚麻酸 |
>10 000 |
<0.10 |
3、样品处理简单、测试量大、测试费用低。
HPLC方法测茉莉酸甲酯存在液相色谱分离困难,杂质峰干扰较严重,色谱峰重叠,易导致错误结果,气相色谱一质谱(GC-MS)和离子检测法虽然可以分离出茉莉酸甲酯但是仪器和试剂昂贵。极谱法,基体效应严重,分子印记技术等实验重现性不好。本司研发的ELISA检测试剂盒,只需要酶标仪,不需要大型仪器,而且灵敏度高、特异性强、快速、成本较低、容易操作,受干扰小,样本前处理简单。尤其适用于大批量样品的检测。本司出品的检测试剂盒都是自己研发生产,不仅产品质量有保证,而且提供完善的全程技术服务,指导用户根据自己的样品特点进行调整,直到用户得到可靠的检测结果。
4、 目前国内ELISA试剂盒鱼龙混杂,产品质量没有保障。ELISA试剂盒最关键的是抗体的质量。我司ELISA试剂盒所用抗体,坚持自主研发和生产,以确保ELISA试剂盒的质量。因此推出速度比较慢,敬请广大用户谅解!