研究生如何做好样本管理

发布日期：2023-12-07 12:48 浏览次数： 作者：admin

        在指导研究生和我司生化测定外包实践中，我发现有些研究生因为忽视样本管理，而给测定工作造成很多麻烦，甚至不可挽回的损失。
        本文分享我的《高级生物化学讲义》中“研究生如何做好样本管理”部分，供需要的研究生参考。
            
        样本合格是生化测定的基础。不合格的样本，不能用于生化测定。
        合格的样本：（1）质可靠，遗传背景清楚无误，取样兼备典型性、代表性和重复性，在取样、运输和保存过程中样本未变质；（2）数合理，处理组合数尽可能少、取样时间点数合适和样本重复数恰当；（3）量充足，每份重复样本的量能够充分保证所有测定指标的测定。
        样本管理的目标：（1）保证生化测定顺利进行；（2）保证生化测定数据可靠。
        样本管理内容：（1）样本不变质；（2）样本不混乱；（3）样本不遗失。
1 样本不变质
        样本不变质：在取样、运输、保存、称量、提取和分离过程中拟测定指标的含量或者酶活性不发生显著改变。
1.1 鲜样
        鲜样：用于测定酶活性和一些易降解的物质含量。最好是取样后马上测定。实际上常常需要保存，等积累了较多样本后才一起测定。
        防止变质的要点：（1）取样，速度快；（2）运输，始终保持在低温中，小包装，速冻，冰袋、干冰或者液氮罐；（3）保存，超低温冰箱，注意冰箱管理，例如规则放置留出合适的空隙，放置在指定位置便于迅速找到自己的样本，警惕停电，尽快测定以免保存时间过长而样本变质；（4）称量，除了在天平上称量外始终保持在低温中，一次取出样本数不宜过多（5~10分钟内称完），称量迅速；（5）提取，匀浆或者超声波处理始终保持在低温中，尤其是超声处理的强度和间隙期，避免大幅升温；（6）分离，提前打开离心机并进行预冷，确保离心时处于设定低温中。
1.2 干样
        干样用于测定样本中稳定的成分，包括糖、脂类、粗蛋白和营养元素等。干样分为风干和烘干两类。
        防止干样变质的要点：（1）干燥处理，取样后迅速按照风干或者烘干要求进行干燥处理，其中烘干过程中很容易导致拟测定指标显著改变，尤其需要进行杀青，注意适当切分成小块后在杀青，严格控制杀青的温度和时间；（2）干样的保存，注意空气湿度，干样对保存温度要求不严格，通常室温即可。如果需要运输回实验室在干燥，那么运输过程中同样需要保持于低温。其它如称量、提取和分离对温度要求都不严格。
2 样本不混乱
        样本混乱：一旦有2个以上样本标签脱落或者模糊，则无法通过核对重新确定，即样本混乱，那么这批样本都得作废。
        防止样本混乱的要点：（1）严格取样记录，以便核对样本，取样记录需要纸质版和电子版双份；（2）做好双标签，即重复样本放在一大袋，每份重复样本单独放在一小袋，大袋和小袋都要做标记；（3）放置在固定地点，尽可能独用冰箱，或者冰箱中一格，以免同学或者同事的样本混放。
3 样本不遗失
        样本遗失：样本一旦遗失，就无法按计划完成生化测定，必须重新准备样本。
        防止样本遗失的要点：（1）取足样本，宁可备而不用，不可用而不备；（2）备份，所有样本分成至少两份，甚至三份，最好分别存放；（3）尽快安排测定，以免夜长梦多，样本遗失。
        我们发现有些用户把全部样本一次性寄送给公司，未用完的样本要求公司寄回。这么做是很危险的：（1）样本遗失，快递丢单，或者公司误清理；（2）样本变质，在快递过程中温度控制不当或者延误，公司保存不当。因此，用户应该按照公司要求寄送本次测定需要的样本量，既满足本次测定需要，又避免样本遗失或者变质。
        再次强调：合格的样本最重要，样本不合格、样本变质、样本混乱或者样本遗失，生化测定就不能进行，或者测定数据不可靠。只要样本合格，样本还有，测定失败，还可以重新测定。相反，样本不合格或者样本没有了，就只能重新准备样本！
        样本准备需要花费很多时间和精力，尤其是珍贵或者稀少的样本。重新准备样本可能导致延毕！