测定意义
胰蛋白酶是一种蛋白水解酶,能选择性的水解蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链,能消化溶解变性蛋白质,对未变性的蛋白质无作用,是一种重要的消化酶。此外,胰蛋白酶还广泛应用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等的辅助治疗。
测定原理
胰蛋白酶催化水解TAME的酯键,释放出的游离羧基与反应体系中的氢氧化钠发生中和反应,导致溶液的pH值降低,以苯酚红为指示剂,测定溶液在555nm处吸收值的变化,可以快速测得胰蛋白酶活性数据。胰蛋白酶在一定范围内与555nm处吸收值的降低呈良好的线性关系。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。